顶空进样器高浓度残留导致的内标物面积变大

日前，在使用顶空-气相色谱法分析血液中酒精含量时（毛细柱进样口+FID检测器），发现进行样品空白分析时，加入了相同体积内标物的两个空白样品谱图中内标物峰面积相差很大。具体如下：

仪器出现响应值突然变小的情况，从GC方面而言，首先，考虑仪器参数是否发生了改变；其次，考虑进样口的常规维护内容：主要为进样针是否损坏和漏液、手动进样是否熟练（即进样是否正常，如有没有扎针不顺、反复扎针状况）、进样隔垫是否需要更换、进样口O型圈是否需要更换；再次，考虑色谱柱是否安装正常（长时间反复升降温使用可能造成柱螺帽松动、漏气）、色谱柱断裂等；最后，考虑检测器的设置和使用状态（如FID检测器极化电压丢失、放大电路板损坏等）及其他可能的原因。

由于本次实验分析采用顶空气相色谱法，增加了顶空进样器可能出现问题的概率，从顶空进样器方面而言，首先，考虑样品的配置是否正确；其次，考虑顶空瓶密封是否严密，是否存在漏气现象；再次，考虑顶空进样器取样针是否堵塞；最后，考虑顶空进样器本身及其与气相色谱的连接是否存在漏气现象。

由于仪器可以正常出峰，同时初步检查了已分析的顶空瓶、顶空进样器取样针和顶空进样器本身及其与气相色谱的连接，未发现漏气、堵塞等相关问题。怀疑可能是样品配置问题，要求用户进行第三次空白分析，发现内标物峰面积继续减小。通过询问仪器使用过程，了解到为确定内标物出峰位置，仪器操作人员使用一定量的叔丁醇（内标物）和水直接配置了未知浓度的叔丁醇的水溶液，直接进行了顶空分析，查看已有谱图发现叔丁醇出峰平顶饱和（信号达到了输出的最大值）。

至此初步判断可能是由于叔丁醇水溶液的浓度过大，造成叔丁醇在顶空进样器中残留比较严重。通过对顶空进样器进行长时间吹扫和多次进样，最终，叔丁醇（内标物）峰面积基本稳定。

本次仪器异常的主要原因是由于使用了过大浓度的样品进行分析导致残留严重。因此，在进行实际样品分析之前，一定要做好仪器空白和样品空白的分析；同时，进行标准样品溶液分析时，应当从低浓度到高浓度样品逐次分析；此外，如果分析高浓度样品之后需要分析低浓度样品，应当根据实际情况做好中间空白，避免高浓度样品残留干扰到低浓度样品的分析。